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 时间 2023-02-18
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企业名称至善(北京)健康医学研究院有限公司

检测流式细胞周期细胞凋亡实验原理

   细胞周期(Cell Cycle)是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程,细胞的遗传物质复制并均等地分配给两个子细胞。细胞周期分为间期与分裂期两个阶段。间期又分为三期:即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)与DNA合成后期(G2期)。某些细胞在分裂结束后暂时离开细胞周期,停止细胞分裂,执行一定生物学功能(G0期)。 
流式细胞仪PI染色法检测细胞周期的原理:G1期细胞主要进行RNA和蛋白的合成, DNA数目为n。S期DNA开始复制,直到复制结束进入M期,DNA数目从n变为2n.。G2期主要是RNA和蛋白的合成,为M期做准备,DNA数目为2n。M期细胞分裂的过程,直到M结束细胞一分为二,DNA数目也是2n.。从DNA的数目上,我们可以将细胞周期分为G0/G1期,S期,G2/M期. 我们利用荧光强度的积分面积来检测,利用直方图来表示,如果G0/G1期处于50的位置,那么G2/M期处于100的位置,期间的为S期。
细胞凋亡是指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同,细胞凋亡不是一件被动的过程,而是主动过程,它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用;它并不是病理条件下,自体损伤的一种现象,而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。检测细胞凋亡的方法有很多种,通常采用TUNEL染色,EDU染色及Annexin Ⅴ/PI双染后进行流式检测等方法。

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